冻融后2-细胞胚胎发育至囊胚建立人胚胎干细胞系

作者：杨华; 刘锋; 王钦; 邓志华; 邹彦; 史秋雯; 丘映; 李东升

来源：第三军医大学学报, 2010, (23): 2568-2570.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2010.23.010

• 人胚胎干细胞系
• 废弃胚胎
• 2-细胞

目的用解冻后废弃胚胎及部分患者捐献的冷冻胚胎建立胚胎干细胞系。方法用程序解冻法解冻2001-2007年来我生殖中心就诊的患者剩余冷冻胚胎,培养至囊胚,Pronase酶去除透明带后,全囊胚置于小鼠饲养层(MEF)中培养获得原代细胞,机械法结合Ⅳ型胶原酶消化法传代,并利用细胞形态观察、免疫荧光染色、核型分析、畸胎瘤切片胚层分析方法对所建胚胎干细胞系进行鉴定。结果序贯培养23枚废弃胚胎,有4枚培养到囊胚阶段;去除透明带后有2枚在MEF上贴壁生长,但只有1株成功扩增稳定传代至第80代;细胞集落呈典型的鸟巢状,有稳定的46XY核型;细胞系表达SSEA-3、SSEA-4、TRA-1-60和TRA-1-81...

• 单位
  南宁市第二人民医院; 湖北医药学院