自然杀伤细胞对宫颈癌HeLa细胞裸鼠移植瘤的治疗效果

作者：杨柳; 楼敏铭; 冯郸; 刘微微; 马洁^*

来源：肿瘤药学, 2020, 10(04): 440-450.

• 自然杀伤细胞
• 宫颈癌HeLa细胞
• 体外杀伤实验
• 裸鼠移植瘤
• 活体成像
• 肿瘤治疗

目的探讨自然杀伤(NK)细胞对人宫颈癌HeLa细胞的体外杀伤作用以及不同浓度NK细胞对宫颈癌HeLa细胞裸鼠移植瘤的治疗效果。方法采用含红色荧光蛋白(RFP)和荧光素酶报告基因(Luc)的慢病毒感染HeLa细胞,荧光倒置显微镜检测细胞中RFP基因的表达,体外成像技术检测Luc基因的表达。分别将不同浓度的NK细胞作用于HeLa-RFP/Luc细胞24、48、72 h,CCK-8法检测NK细胞对靶细胞的杀伤作用。将HeLa-RFP/Luc细胞接种于BALB/c-nu裸鼠皮下,建立宫颈癌裸鼠移植瘤模型,待肿瘤生长至100 mm3时,随机分为模型组、NK高剂量组、NK低剂量组、空白对照组,每组10只。给药4个疗程后,观察各组裸鼠的一般状况,每周测量体重及瘤体大小,体外活体成像观察裸鼠瘤体的荧光变化。治疗周期结束后,剥离瘤体,称重,取脾脏组织,采用ELISA法检测脾脏组织液中肿瘤相关基因的表达。结果 NK细胞对HeLa-RFP/Luc细胞的体外杀伤率呈时间和剂量依赖性,效靶比越大则杀伤作用越强,且作用72 h后,各效靶比的杀伤率均达90%以上。成功筛选出共表达RFP和Luc基因的HeLa-RFP/Luc细胞株。NK细胞治疗对裸鼠的体重无明显影响(P>0.05),但随着治疗周期的延长,治疗组裸鼠瘤体体积和荧光值的增长速率均明显低于模型对照组(P<0.05)。与模型对照组相比,NK细胞治疗后各组裸鼠雌激素E2水平均无明显变化(P>0.05),IL-2、IFN-γ水平显著升高,IL-4水平显著降低(P<0.05)。结论 NK细胞治疗可延缓人宫颈癌HeLa细胞的生长,下调促肿瘤因子的表达,且在治疗3个疗程后效果最佳。