扇贝过敏原荧光免疫层析检测方法的构建与应用

作者：党雪文; 张自业; 赵金龙; 李冉冉; 王雅晴; 林洪; 王皓; 李振兴^*

来源：食品安全质量检测学报, 2023, 14(02): 50-58.

DOI：10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.2023.02.007

• 时间分辨荧光微球
• 免疫层析
• 扇贝过敏原
• 原肌球蛋白
• 快速检测

目的 构建一种简便、快速、可降低非特异性荧光干扰的时间分辨免疫层析检测方法,实现快速检测扇贝中原肌球蛋白(tropomyosin,TM)过敏原。方法 本研究采用双抗体夹心免疫层析法,以含有铕(Eu)纳米微粒的荧光微球作为标签偶联兔抗TM多克隆抗体,制备荧光探针并对其进行表征。以4 mg/mL兔多克隆抗体作为T线,羊抗兔免疫球蛋白G (immunoglobulin g,IgG)作为C线组装免疫层析试纸条。结果 本研究组建的试纸条视觉检出限为0.05μg/mL,仪器检出限为0.01μg/mL。试纸条除对虾蟹有交叉反应外,对其他10余种物种无明显交叉反应。加标样品批内和批间变异系数分别为3.71%～7.94%和12.09%～12.80%,在不含TM的4种食物基质中加入浓度由低到高的TM,检测结果与实际加标情况相符。结论 本检测方法准确性良好、灵敏度高、特异性强,可在多种食物基质中实现对扇贝TM的快速检测。

• 单位
  中国海洋大学