重组淡色库蚊乙酰胆碱酯酶的基因表达及活性测定

作者：李春晓; 赵彤言; 刘美德; 董言德

来源：寄生虫与医学昆虫学报, 2006, 13(02): 31-35.

DOI：10.3969/j.issn.1005-0507.2006.02.007

• 淡色库蚊
• 乙酰胆碱酯酶
• 杆状病毒表达系统 Culex pipiens pallens
• Acetylcholinesterase
• Bac-to-Bac expression system

将淡色库蚊乙酰胆碱酯酶基因作为目的基因插入到昆虫杆状病毒表达系统的pFastBac1供体质粒中,利用Tn7转座子同BacmidDNA同源重组,获得了含目的基因片段的重组杆状病毒DNA,并利用其转染Sf9昆虫细胞,72h后收集细胞悬液,再用该悬液侵染Sf9昆虫细胞,48h后收获重组蛋白。以碘化硫代乙酰胆碱为底物,检测重组表达AChE1的生物学活性,结果显示细胞上清中和细胞内的重组表达酶均具有生物学活性,采用SDSPAGE检测也获得了与预期一致的结果。

• 单位
  病原微生物生物安全国家重点实验室; 军事医学科学院