TGF-α与绿脓杆菌外毒素融合蛋白的表达、纯化及对肿瘤细胞的杀伤作用

作者：李; 夏辉; 马洁

来源：中国肿瘤生物治疗杂志, 2004, (04): 244-247.

• 绿脓杆菌外毒素
• TGF-α
• 融合蛋白
• EGF受体
• 肿瘤 pseudomonas extoxin 40
• TGF-α
• fusion protein
• EGF receptor
• tumor

目的:表达并纯化转化生长因子α与绿脓杆菌外毒素融合蛋白(TGFα-PE40),探讨其对EGF受体(EGFR)阳性肿 瘤细胞的靶向杀伤作用。方法:用pET28a表达载体构建表达TGFα-PE40蛋白的重组体pV28,IPTG诱导其表达后,提取包涵 体蛋白并用Ni柱纯化,MTT法观察复性融合蛋白对肿瘤细胞A431和SK-OV3的杀伤效用。结果:成功构建基因重组质粒 pV28,纯化后的包涵体蛋白中TGFα-PE40蛋白纯度达98％以上,这种活性毒素蛋白对EGFR高表达的A431癌细胞抑制率为 50％(IC50)时所需蛋白浓度为(0.86±0.07)μg／ml,低于EGFR低表达的SK-OV3癌细胞的...

• 单位
  中国医学科学院肿瘤研究所; 分子肿瘤学国家重点实验室