Let-7d靶向LOX-1逆转ox-LDL诱导血管内皮细胞凋亡观察

作者：闫杰^*; 陈静; 黄宇玲; 葛庆锋; 刁增利; 苏鹏宇; 李燕

来源：郑州大学学报(医学版), 2018, 53(05): 564-569.

DOI：10.13705/j.issn.1671-6825.2018.05.041

• Let-7d
• LOX-1
• ox-LDL
• 人脐静脉内皮细胞
• 凋亡

目的 :研究Let-7d对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡以及凝集素样氧化低密度脂蛋白清除受体1(LOX-1)表达的影响。方法:用50 mg/L的ox-LDL处理HUVECs 24 h和48 h,分别采用Western blot和RT-q PCR法检测LOX-1和Let-7d表达的变化。Target Scan和双荧光素酶报告基因实验预测LOX-1与Let-7d之间的靶向调控关系。将miRNA模拟物对照(NC)和Let-7d单独或联合50 mg/L的ox-LDL处理HUVECs 48 h,分别记为NC组、Let-7d组、NC+ox-LDL组和Let-7d+ox-LDL组,采用Western blot和RT-q PCR法检测各组中LOX-1、Caspase 3、Bax和Bcl-2蛋白表达及LOX-1 mRNA表达,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率。结果:用50 mg/L的ox-LDL处理HUVECs 0 h、24 h和48 h后,各组HUVECs中LOX-1蛋白表达增加,Let-7d表达降低(P<0.05)。Target Scan和双荧光素酶报告基因实验表明LOX-1可能是Let-7d的靶基因。NC组、Let-7d组、NC+ox-LDL组和Let-7d+ox-LDL组HUVECs中LOX-1的表达、细胞凋亡率及Caspase 3、Bax、Bcl-2蛋白表达比较,差异均有统计学意义(P <0. 001)。ox-LDL可诱导HUVECs中LOX-1、细胞凋亡率和促凋亡蛋白Caspase 3、Bax表达增加,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低;Let-7d能够显著抑制ox-LDL对HUVECs中LOX-1表达、细胞凋亡率及促凋亡蛋白Caspase 3、Bax表达的诱导作用和抗凋亡蛋白Bcl-2表达的抑制作用(P <0. 05)。结论:Let-7d能够逆转ox-LDL诱导的HUVECs凋亡,其机制可能与Let-7d靶向抑制LOX-1表达有关。

• 单位
  华北理工大学; 生命科学学院