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摘要
在炎症反应或在氧化应激的情况下,机体内的蛋白酶体会转变成免疫蛋白酶体,从而在炎症类疾病中发挥作用。为了研究免疫蛋白酶体在伪狂犬病毒(PRV)感染中的作用,本研究随机将25只C57BL/6小鼠分成5组,5只/组,1组对照组,4组实验组:分别为感染5 d(5 dpi)组、感染7 d(7 dpi)组、感染9 d(9 dpi)组和感染11 d(11 dpi)组。将PRV Bartha株以6.8×104TCID50的剂量经后肢皮下注射感染小鼠,每天观察其临床症状。在感染后的11 d内,小鼠出现了被毛凌乱、体重减轻和轻微的神经症状。于感染后的第5 d、7 d、9 d和11 d颈椎脱臼迫杀各组小鼠后采集脑组织,经荧光定量PCR方法检测小鼠脑组织的病毒拷贝数。结果显示,在小鼠脑组织检测出了PRV,且9 dpi组小鼠病毒的拷贝数高达4.93×106拷贝/μL;小鼠脑组织病理切片可见,小鼠产生了非化脓性脑炎,脑组织出现血管套现象并伴有炎性细胞的浸润;经荧光定量PCR方法检测各组小鼠脑组织免疫蛋白酶体亚基和促炎性细胞因子的转录水平。结果显示,各感染组小鼠脑组织免疫蛋白酶体亚基LMP2、LMP7以及LMP10的转录水平均明显上调,其中LMP2亚基的转录水平最高,与对照组相比9 dpi组小鼠脑组织LMP2亚基的转录水平上调了332倍(p<0.001);各感染组小鼠促炎性细胞因子IFN-γ、IL-6、IL-1β和TNF-α的转录水平也均上调,其中9 dpi组小鼠的IFN-γ转录水平与对照组相比上调了1 420倍(p<0.01)。Western blot结果显示,各感染组小鼠脑组织免疫蛋白酶体亚基LMP2、LMP7和LMP10均被诱导表达。上述结果表明PRV Bartha株感染小鼠后,会诱发其脑组织炎症和免疫蛋白酶体的表达,且随着感染时间的延长(5 dpi～9 dpi),小鼠脑组织炎性因子与免疫蛋白酶体亚基的转录水平和蛋白表达水平均呈增加趋势。本实验为研究免疫蛋白酶体在PRV致病机理中的作用奠定了基础,并为进一步研究疱疹病毒诱发的中枢神经系统炎症反应提供了参考依据。
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单位中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室
