NeuroD1基因过表达对大鼠神经干细胞增殖和分化的影响

作者:张仁坤; 李晓红; 陈星; 王景景; 涂悦; 张赛
来源:武警后勤学院学报(医学版), 2016, 25(07): 505-500.
DOI:10.16548/j.2095-3720.2016.07.001

摘要

【目的】神经干细胞(neural stem cells,NSCs)是一群能自我更新并具有多种分化潜能的细胞,可分化成神经元、少突胶质细胞和星形细胞。NSCs分化受多种转录因子调控网络的影响,本实验旨在研究神经分化因子1(neuronal differentiation1,Neuro D1)过表达对NSCs增殖和分化的影响。【方法】分离培养原代大鼠NSCs,免疫荧光染色鉴定NSCs。将携带Neuro D1基因的逆转录病毒转染NSCs,QPCR检测Neuro D1过表达神经干细胞系的构建。QPCR和MTT检测过表达Neuro D1对NSCs增殖和分化的影响;光镜下观察分化细胞形态变化。【结果】第3代NSCs经免疫荧光染色证实所培养细胞为NSCs,可分化为神经元和星形胶质细胞。QPCR结果显示Neuro D1 m RNA在NSCs-Neuro D1组表达最高,与其他两组有统计学差异(P<0.05)。QPCR结果显示MAP2在NSCs-Neuro D1组表达最高,与其他两组有统计学差异(P<0.05)。MTT结果显示NSCs-Neuro D1组细胞增殖水平最高,与其他两组有统计学差异(P<0.05)。光镜下可见NSCs-Neuro D1组细胞多分化为神经元细胞。【结论】成功构建Neuro D1过表达神经干细胞系。Neuro D1可促进NSCs增殖和向神经元方向分化。

  • 单位
    武警后勤学院

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