摘要
目的 探究槐耳提取物对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞增殖、侵袭及铁死亡通路的影响。方法 体外培养CRC细胞系SW620,不同浓度(0、5、10、20及50 mg/mL)的槐耳提取物溶液处理细胞,采用细胞计数试剂8(cell counting kit 8,CCK8)检测不同浓度梯度下CRC细胞增殖情况并进行实验剂量探讨;Transwell和划痕实验检测细胞侵袭迁移能力;活性氧、谷胱甘肽、丙二醛试剂盒检测细胞氧化应激水平;Western blot法检测铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,NRF2)、高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)水平。结果 本研究观察实验剂量为10、20 mg/mL浓度的槐耳提取物溶液干预CRC细胞后48 h时发现能明显抑制CRC细胞增殖,因此选择0(对照)、10、20 mg/mL(实验)浓度作为实验剂量。Transwell和划痕实验检测结果均发现实验浓度时能有效抑制CRC细胞的侵袭能力(Transwell实验:F=480.0、P<0.001;划痕实验:F=24.33、P=0.001),能有效促进SW620细胞的凋亡且呈剂量依赖性增加(F=806.3、P<0.001),谷胱甘肽水平呈现的趋势(F=35.0、P=0.005)与活性氧一致,但在MDA检测结果中10 mg/mL浓度时的MDA水平(F=22.91、P=0.002)高于0和20 mg/mL浓度时,此外发现均能有效下调GPX4(F=74.25、P<0.001)、NRF2(F=32.81、P=0.001)及HMGB1(F=55.08、P<0.001)蛋白表达且呈剂量依赖关系。结论 从本实验结果看,在一定浓度范围内的槐耳提取物,可能通过诱导SW620细胞的铁死亡从而抑制CRC细胞的增殖与侵袭迁移。
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单位武汉大学人民医院; 广西壮族自治区人民医院