微量柿幼胚DNA提取组织及方法筛选

作者：徐丹; 曾思雨; 郑方梅; 王扎么龙英; 李清国; 郭大勇; 张青林; 罗正荣; 徐莉清

来源：分子植物育种, 2022, 1-7.

• 柿(Diospyros kaki Thunb.
• 幼胚
• 微量DNA提取
• RO2标记

分子标记辅助目标性状早期鉴定亟待建立高效DNA提取方法。本研究以花后70～90 d的柿(Diospyros kaki Thunb.)幼胚为试材，探讨不同组织部位和提取方法对DNA得率和质量的影响。结果表明：(1)以幼胚单片子叶作为DNA提取试材更好，不影响同一幼胚培养成苗且DNA提取的平均产率较高；(2)改良十六烷基三甲基溴化胺(cetyltriethylammonium bromide， CTAB)法提取柿幼胚微量DNA的A_(260)/A_(280)值为1.91～2.07，利用单片子叶可获得1 807.03 μg/g的DNA，可满足后续分子标记鉴定需求；(3)中国甜柿自然脱涩性状连锁标记RO2聚合酶链式反应(RO2-polymerase chain reaction， RO2-PCR)可获得清晰的扩增条带。因此，本研究获得的单子叶微量DNA提取技术可用于中国甜柿在幼胚阶段目标性状的鉴定。

• 单位
  华中农业大学; 园艺植物生物学教育部重点实验室