摘要
分子标记辅助目标性状早期鉴定亟待建立高效DNA提取方法。本研究以花后70~90 d的柿(Diospyros kaki Thunb.)幼胚为试材,探讨不同组织部位和提取方法对DNA得率和质量的影响。结果表明:(1)以幼胚单片子叶作为DNA提取试材更好,不影响同一幼胚培养成苗且DNA提取的平均产率较高;(2)改良十六烷基三甲基溴化胺(cetyltriethylammonium bromide, CTAB)法提取柿幼胚微量DNA的A_(260)/A_(280)值为1.91~2.07,利用单片子叶可获得1 807.03 μg/g的DNA,可满足后续分子标记鉴定需求;(3)中国甜柿自然脱涩性状连锁标记RO2聚合酶链式反应(RO2-polymerase chain reaction, RO2-PCR)可获得清晰的扩增条带。因此,本研究获得的单子叶微量DNA提取技术可用于中国甜柿在幼胚阶段目标性状的鉴定。
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单位华中农业大学; 园艺植物生物学教育部重点实验室