弱酸环境下食管内皮细胞活力与分泌因子的变化

作者：林逊汀; 欧阳慧; 黄明城; 林玉妹; 谢晨曦^*

来源：广州医药, 2023, 54(10): 20-27.

• 弱酸
• 细胞活力
• p38
• 炎症因子

目的 采用体外试验的方法，研究弱酸性培养对人正常食管内皮细胞（HEEC）活力的影响及潜在的调控机制。方法 细胞培养液的pH值分别设为（6.0～6.5）和（7.0～7.4）。以中性培养组为对照。利用CCK8实验，检测弱酸培养条件下，不同时间点食管内皮细胞活力的变化。采用蛋白免疫印迹法检测p38和磷酸化p38(p-p38)的表达。利用酶联免疫吸附剂测定法检测培养基上清液中IL-1β和IL-8的表达水平，并检测加入p38激酶活性抑制剂SBS 203580后两者浓度的变化。结果 弱酸环境下，细胞活力下降。培养1 h时，弱酸组细胞活力为（96.4±8.0）%，培养3 h和6 h时分别为（88.7±6.2）%和（87.7±7.4）%。细胞中p38的水平与培养基的pH值无关。弱酸培养可以促使细胞内p-p38的含量增加。基线时，弱酸组p-p38的灰度值比值为（0.37±0.02），在培养2 h和6 h时分别为（0.64±0.09）、（0.84±0.11），差异显著（P<0.01）。弱酸刺激诱导食管内皮细胞表达更多的IL-8和IL-1β。基线时弱酸组上清液中IL-8和IL-1β的浓度分别为（8.64±1.31）pg/mL,(3.35±0.49)pg/mL。培养6 h后，二者的浓度分别上升至（36.85±2.02）pg/mL和（19.19±1.60）pg/mL，差异显著（P<0.01）。加入SBS 203580后，IL-8和IL-1β的浓度明显下降（P<0.05）。结论 弱酸刺激可以降低食管内皮细胞的活力。p38 MAPK可能通过调控IL-8和IL-1β的表达参与该调节过程。

• 单位
  厦门大学附属中山医院; 中山大学