特异性siRNA质粒的构建及其抑制癌细胞中mcl-1表达的研究

作者：徐爱群; 曹以诚; 区镜深; 张珍武

来源：现代食品科技, 2010, 26(8): 789-792,783.

DOI：10.3969/j.issn.1673-9078.2010.08.005

• 肝癌
• mcl-1
• 基因沉默
• 实时荧光定量PCR

本文构建了靶向mcl-l基因构建的特异性siRNA重组质粒,在细胞水平检测的其抑制效果,并筛选出能高效抑制mcl-l基因表达的siRNA重组质粒,针对mcl-1的特异性siRNA重组质粒,将其转染到人肝癌细胞HepG2,用Rt-PCR(实时荧光定量PCR)方法和Western Blot方法分别检测转染前后mcl-1mRNA水平和Mcl-1蛋白表达水平,比较对应不同位点的两个siRNA重组质粒对mcl-1的抑制效果.结果表明,Rt-PCR结果显示对应不同位点的两个siRNA重组质粒对mcl-1均可降低mcl-1 mRNA水平,最大抑制效率达70.0%,远高于作为对照非相关组;Western-Blot结果显示转染特异性siRNA重组质粒后Mcl-1蛋白表达受到抑制,最大抑制率为44.2%.合理设计的特异性siRNA重组质粒可大幅度下调mcl-1 mRNA水平,能有效抑制Mcl-1蛋白表达.

• 单位
  华南理工大学