摘要

目的 :探讨富马酸二甲酯(DMF)对亚砷酸钠(NaAsO2)诱发小鼠胰岛MIN6细胞氧化应激损伤的保护作用及相关机制。方法 :筛选DMF最适处理浓度,将MIN6细胞随机分为正常对照组、NaAsO2组、低剂量DMF预处理+NaAsO2组、高剂量DMF预处理+NaAsO2组。MTT法检测细胞活性;TUNEL荧光染色法检测细胞凋亡;DCFH-DA荧光探针法检测活性氧自由基(ROS)水平;免疫细胞荧光法观察细胞内核因子E2相关因子2(Nrf2)定位表达;免疫印迹检测Nrf2蛋白表达水平;Real-time RT-PCR检测Nrf2、血红素加氧酶1(Ho-1)、硫氧还蛋白1(Trx1)、γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚单位(Gclc)、γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶调节亚单位(Gclm)mRNA表达水平。结果 :与NaAsO2组比较,DMF预处理可以显著提高MIN6细胞活性,减少细胞凋亡数量,降低细胞内ROS的水平。DMF预处理+NaAsO2组MIN6细胞内的Nrf2 mRNA和蛋白表达明显高于NaAsO2组,特别是细胞核内Nrf2表达显著增多,且呈显著的剂量依赖性。DMF预处理+NaAsO2组MIN6细胞Ho-1、Trx1、Gclc和GclmmRNA表达亦出现明显增加。结论 :DMF可能通过上调Nrf2/ARE信号通路,拮抗亚砷酸钠对胰岛MIN6细胞氧化应激损伤,发挥保护作用。