基于PI3K/AKT/mTOR探索硼替佐米对多发性骨髓瘤侧群细胞的作用机制

作者：刘淑艳; 张蕴; 林圣云^*

来源：中华全科医学, 2020, 18(03): 365-369.

DOI：10.16766/j.cnki.issn.1674-4152.001248

• 硼替佐米
• 多发性骨髓瘤
• 侧群细胞
• 耐药性

目的探讨26S蛋白酶体抑制剂硼替佐米对多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226和骨髓瘤侧群(side population,SP)细胞的作用机制及其耐药性。方法在RPMI8226和SP细胞增殖以及生长周期和凋亡差异性研究基础上,采用Western blotting方法检测硼替佐米对2种细胞内信号通路PI3K/AKT/mTOR磷酸化水平的影响;通过硼替佐米耐药性研究,开展RPMI8226和SP细胞对硼替佐米耐药机制的探索。结果 SP细胞48 h相对细胞活力(3.62±0.28)显著高于RPMI8226细胞(2.81±0.24,P=0.028);克隆形成能力结果显示SP细胞显著强于RPMI8226细胞(P<0.05)。流式细胞术检测显示硼替佐米增加了2种细胞S期、降低G2/M期,对RPMI8226的促凋亡率(51.23±5.35)显著高于SP细胞凋亡率(29.62±2.61,P=0.008)。Western blotting结果显示硼替佐米显著降低RPMI8226和SP细胞AKT、mTOR及4E-RP1磷酸化水平;耐药性结果显示SP细胞耐药相关蛋白P-gp、Caveolin-1(Cav-1)、Fatty acid synthase(FASN)及CYP3A4表达显著高于RPMI8226细胞。结论硼替佐米主要通过细胞凋亡和降低PI3K/AKT/mTOR信号蛋白磷酸化水平,发挥对RPMI8226和SP细胞的抑制作用;通过P-gp、Cav-1、FASN以及CYP3A4耐药蛋白发挥对多发性骨髓瘤的耐药性。

• 单位
  浙江中医药大学; 浙江省中医院