PMA-qPCR方法快速检测Lactobacillus paracasei N1115活菌的初步研究

作者：张栋; 冯丽莉; 薛玉玲; 王华; 荀一萍; 李兴佳; 朱宏; 王世杰

来源：食品工业科技, 2016, 37(18): 70-73+80.

DOI：10.13386/j.issn1002-0306.2016.18.005

• 副干酪乳杆菌N1115
• 叠氮溴化丙锭
• 荧光定量PCR

目的:建立快速准确的副干酪乳杆菌N1115(Lactobacillus Paracasei N1115)活菌的荧光定量检测方法并应用于菌粉的活菌计数。方法:根据副干酪乳杆菌N1115的苯丙氨酰-tRNA合成酶α亚基基因(phe S)设计特异性引物;使用叠氮溴化丙锭(Propidium monoazide PMA)抑制死菌DNA扩增,然后通过q PCR的方法检测菌粉中的N1115的活菌数。结果:经验证得到一对N1115特异引物:C15F、C15R;副干酪乳杆菌N1115在90℃水浴条件下热损伤时间为8 min;PMA对于N1115死菌DNA的扩增有明显的抑制效果;PMA-q PCR能够快速准确的测得菌粉中N1115活菌数。结论:建立了一种快速、准确的副干酪乳杆菌N1115活菌的荧光定量检测方法。

• 单位
  公共卫生学院; 四川大学