抗VEGFR-2全人源IgG1抗体的构建及其在CHO-k细胞中的表达

作者：李致科; 何远; 张娟; 解伟; 曹婉璐; 王泽根; 王旻

来源：药学学报, 2013, (10): 1544-1549.

DOI：10.16438/j.0513-4870.2013.10.009

• VEGFR-2
• 全长抗体
• 抗肿瘤血管生成 VEGFR-2
• full length antibody
• anti-tumor angiogenesis

本文在实验室构建的单链抗体-Fc融合抗体[scFv(AK404R)-Fc]的基础上构建抗VEGFR-2全人源IgG1样全长抗体(Mab-04)。利用重叠PCR,获得Mab-04的轻链和重链的核酸序列后分别克隆到真核表达载体pcDNA3.1,获得重组质粒。脂质体法将重组质粒转染至CHO-k细胞,经Protein A柱纯化细胞培养上清液获得目的蛋白,利用Western blotting检测目的蛋白,ELISA检测Mab-04与抗原亲和力。测序表明重组质粒构建成功,Western blotting检测显示目的蛋白成功表达(1μg·mL-1),ELISA检测阐明该抗体能与抗原结合并呈浓度依赖性(IC5...

• 单位
  中国药科大学; 天然药物活性组分与药效国家重点实验室