孕烷X受体可上调HepG2细胞内PDCD4的表达

作者：王少兰; 李涛; 杜婧; 韩曼; 鞠迪

来源：南方医科大学学报, 2020, 40(03): 370-375.

• 孕烷X受体
• PDCD4
• miRNA21
• HepG2细胞

目的探究孕烷X受体(PXR)对HepG2细胞程序性细胞死亡因子(PDCDs)的调控作用及其分子机制。方法 HepG2细胞给予不同的PXR激动剂刺激24 h,分为利福平(10μmol/L)组、SR12813(1μmol/L)组和DMSO对照组;采用持续激活型PXR的腺病毒感染HepG2细胞(VP-PXR组和Mock对照组)36 h。应用qRT-PCR技术检测PDCD2、PDCD4、PDCD5、PDCD6基因以及miRNA21的表达变化,采用Western blot技术检测PDCD4的蛋白表达水平。运用生物信息学方法预测PDCD4启动子区存在的潜在PXR结合反应元件(PXREs)。结果 qRT-PCR结果显示利福平与对照组相比,PDCD2的表达显著下调(t=-2.875,P<0.05),PDCD4表达则显著上调(t=4.209,P<0.01),而PDCD5和PDCD6无明显差异。SR12813与对照组相比,PDCD4表达明显升高(t=4.574,P<0.01),PDCD2、PDCD5和PDCD6均无明显变化。同时,利福平、SR12813组与对照组相比,PXR经典靶基因MDR1的表达显著升高(P<0.05);VP-PXR与Mock对照组相比,PDCD2和PDCD6的基因表达无明显差异,PDCD4基因的表达则显著上调(t=3.343,P<0.05),MDR1的表达也显著升高(t=3.343,P<0.01);给予利福平刺激后,PDCD4的蛋白表达比对照组显著升高(t=2.779,P<0.05);PDCD4的蛋白在VP-PXR组也显著高于Mock组(t=3.066,P<0.05);机制研究发现利福平或VP-PXR腺病毒刺激细胞后与各自对照组相比,PDCD4上游负调控因子miRNA21表达均无明显差异。利用生物信息学软件分析后发现,PDCD4启动子区存在PXREs。结论 PXR活化上调HepG2细胞内PDCD4的表达,但不依赖于miRNA21,PDCD4在HepG2细胞可能是PXR的靶基因。

• 单位
  基础医学院; 陕西中医药大学