摘要
【目的】探讨微小RNA29a(mi R-29a)在小鼠子宫内膜基质细胞(ESC)蜕膜化中的作用。【方法】收集孕第1~9天(D1~D9)的小鼠子宫,通过实时定量PCR(q RT-PCR)的方法检测小鼠子宫组织中mi R-29a的表达;构建去除卵巢及其甾体激素的处理模型,观察甾体激素对mi R-29a表达的影响。采用雌二醇(E2)和孕酮(P4)对分离培养的小鼠子宫内膜基质细胞进行蜕膜化处理,并通过瞬时转染的方法下调mi R-29a的表达,分别收集蜕膜化处理不同时间及干扰前后的细胞,采用q RT-PCR检测催乳素相关蛋白(d PRP)m RNA的表达,Western blot法检测细胞周期蛋白D3(cyclin D3)、孕酮受体(PR)蛋白的表达。【结果】在小鼠妊娠第1~5天,子宫组织中的mi R-29a表达量较低,随着蜕膜化的进程(妊娠第6~9天),mi R-29a的表达量均显著性增加(与妊娠D1相比);在去除卵巢及其甾体激素的处理模型中,一旦给予雌孕激素刺激,mi R-29a的表达量显著增加;在小鼠子宫内膜基质细胞体外诱导蜕膜化过程中,q RT-PCR结果显示d PRP m RNA的表达以及mi R-29a的表达随着蜕膜化时间的延长逐渐升高(与24 h相比),Western blot法显示蜕膜化标志分子cyclin D3、PR的表达也随着蜕膜化时间的延长逐渐升高;转染下调mi R-29a后,蜕膜化标志分子及mi R-29a的表达也相应下降。【结论】妊娠早期mi R-29a表达于母胎界面,且受子宫内膜蜕膜化的影响,说明mi R-29a具有促进子宫内膜蜕膜化的作用。
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单位中南大学; 中信湘雅生殖与遗传专科医院; 生殖与干细胞工程研究所