螺虫乙酯单克隆抗体的制备及酶联免疫分析方法的建立

作者：赵静; 赵其阳; 张耀海; 何悦; 焦必宁^*; 崔永亮^*

来源：食品与发酵工业, 2022, 48(10): 247-254.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.028552

• 螺虫乙酯
• 单克隆抗体
• 酶联免疫分析
• 蔬菜
• 水果

螺虫乙酯是一种杀虫杀螨剂，它通过抑制乙酰辅酶A羧化酶活性，阻断害虫正常的能量代谢，最终致其死亡。由于其作用高效，被广泛应用于防治果蔬中的刺吸口器类害虫和害螨。然而，螺虫乙酯对人和动物有毒性。该研究旨在通过制备螺虫乙酯的单克隆抗体并建立酶联免疫分析方法实现蔬菜、水果和环境样品中螺虫乙酯残留的快速检测。首先设计合成了一种新型的螺虫乙酯半抗原，通过活泼酯法偶联牛血清白蛋白得到免疫原，免疫小鼠筛选得到特异性识别螺虫乙酯和B-enol的单克隆抗体(mAb 3D11G7)。在优化的条件下，建立间接竞争酶联免疫分析方法(indirect homologous competitive enzyme-linked immunosorbent assay, icELISA),其半数抑制质量浓度(half maximal inhibitory concentration, IC50)值为2.1μg/L,最佳工作范围为0.5～8.6μg/L。选择河水、土壤、番茄和柑橘基质进行加标回收实验，其平均加标回收率为72.9%～110.1%。该研究建立的icELISA与超高效液相色谱-串联质谱测定柑橘样品结果的相关性R2为0.965 2,即两种方法的检测结果具有一致性。以上结果表明，该研究开发的icELISA能够用于监测蔬菜、水果和环境样品中螺虫乙酯的残留。

• 单位
  中国农业科学院柑桔研究所