响应面法优化灵芝胞外漆酶酶活测定反应体系

作者：王胜; 于廷连; 张雪超; 李金涛; 闫梅霞^*

来源：特产研究, 2023, 1-8.

DOI：10.16720/j.cnki.tcyj.2023.203

• 灵芝漆酶
• ABTS
• 反应条件
• 响应面优化

为探索一种最佳的灵芝胞外漆酶酶活力测定反应体系，从而确定更为准确测定酶活力的方法。本研究以灵芝漆酶为研究对象，以2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)为底物，采用分光光度法确定最佳酶促反应时间以及最大吸收波长，使用柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液，选取酶活力测定反应体系中的缓冲液浓度、pH以及反应温度作为影响因素进行单因素优化，以所测定灵芝漆酶酶活力为响应值进行响应面优化与评估。结果表明，酶促反应中最佳酶活力测定时间为起始3 min，最大吸收波长为420 nm。柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液中，灵芝漆酶的最佳测定条件为缓冲液浓度0.19 mol/L、反应温度29.7℃、pH 3.45，灵芝漆酶活性为52.56 U/mL。本研究基于响应面法灵芝漆酶反应条件进行优化，提高检测的准确度，为后续灵芝漆酶的相关研究提供参考，以及为灵芝漆酶的进一步开发与应用奠定基础。

• 单位
  中国农业科学院特产研究所