miR-34a通过靶向SIRT 1蛋白调控氧化型低密度脂蛋白介导的HCAECs凋亡的研究

作者：崔晓磊; 高恒波; 姚冬奇; 刘亮; 张睿; 吕宝谱; 田英平^*

来源：中国急救医学, 2021, 41(01): 55-59.

• 动脉粥样硬化
• 冠状动脉内皮细胞
• 增殖
• 凋亡

目的探讨氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)干预人冠状动脉内皮细胞(HCAECs后miR-34a的表达情况及其对细胞损伤的影响和作用机制。方法将HCAECs用30μg/m L ox-LDL干预后观察0、12、24、48 h miR-34a表达变化。验证ox-LDL干预后miR-34a表达时,将HCAECs分为正常对照(CON)组、阴性对照(NC)组和In-miR-34a组;验证miR-34a与SIRT 1的相互关系时,将HCAECs分为正常对照(CON)组、阴性对照(Sham)组和SIRT 1 siRNA组。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测定ox-LDL干预后HCAECs内miR-34a的表达情况;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法与流式细胞术检测细胞转染miR-34a抑制剂后miR-34a表达及细胞凋亡相关指标的变化; Western blot法检测相关蛋白表达变化;双荧光素酶活性检测miR-34a与SIRT 1 3’-UTR区的调节作用。结果 ox-LDL上调HCAECs中miR-34a的表达呈现浓度和时间依赖性。给予miR-34a抑制可显著增强HCAECs细胞的生存率,减少因ox-LDL引发的细胞凋亡,这一结果可能是由于SIRT 1蛋白表达上调所致。双荧光素酶活性检测实验证实,miR-34a抑制剂转染细胞的SIRT 1蛋白相对荧光强度显著升高;抑制SIRT 1蛋白表达可一定程度上逆转miR-34a抑制剂对细胞活力与凋亡的影响。结论 miR-34a在ox-LDL干预的HCAECs中表达增加,给予miR-34a抑制剂可能通过SIRT 1蛋白逆转细胞凋亡。

• 单位
  河北医科大学第二医院