过/降表达miR-4746的食管鳞癌细胞增殖、迁移、侵袭能力及TGF-β/Smad通路蛋白表达观察

作者：李雨珊; 张仁静; 侯维; 蹇顺海; 向月; 何欣蓉^*

来源：山东医药, 2022, 62(05): 30-34.

• miR-4746
• 食管鳞癌
• 细胞增殖
• 细胞迁移
• 细胞侵袭
• 转化生长因子β
• Smad4

目的 观察过/降表达miR-4746的食管鳞癌细胞增殖、迁移、侵袭能力及转化生长因子β(TGF-β)/Smad通路蛋白的表达。方法 选取人食管鳞癌细胞ECA-109、TE-1和正常食管上皮细胞HEEC,采用实时荧光定量PCR法检测各细胞中miR-4746的表达水平。取miR-4746表达最高的食管鳞癌细胞分为miR-4746 mimic组、miR-4746inhibitor组及对照组,分别转染miR-4746过表达、miR-4746抑制及对照质粒。采用CCK-8法观察细胞增殖能力,划痕实验观察细胞迁移能力,Transwell实验观察细胞侵袭能力。通过实时荧光定量PCR.法和Western blotting法分别检测TGF-β/Smad通路相关分子TGF-β_1、TGF-βRⅡ、Smad4的mRNA和蛋白相对表达量。结果 miR-4746在ECA-109、TE-1细胞中的相对表达量均高于HEEC(P均<0.01),其中TE-1细胞的miR-4746表达量最高。各时点细胞吸光度值、细胞迁移距离、穿膜细胞数比较,miR-4746 mimic组>对照组> miR-4746 inhibitor组(P均<0.05)。TGF-β_1 mRNA及蛋白表达量miR-4746 mimic组>对照组> miR-4746 inhibitor组,TGF-βRⅡmRNA、Smad4 mRNA及蛋白表达量miR-4746inhibitor组>对照组>miR-4746 mimic组(P均<0.05),各组TGF-βRⅡ蛋白表达量比较差异无统计学意义。结论 miR-4746可促进食管鳞癌细胞的增殖、迁移及侵袭,其作用可能通过调控Smad4低表达,抑制TGF-β/Smad通路实现。

• 单位
  川北医学院; 川北医学院附属医院; 南充市中心医院