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摘要
目的观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因过表达/沉默对缺氧诱导肾小管上皮细胞(RTEC)坏死性凋亡标志物表达的调控作用。方法将RTEC细胞随机分为对照组、缺氧损伤组、过表达组和沉默组,过表达组细胞转染过表达PPAYγ基因的外源性LV-Pparg病毒,沉默组细胞转染沉默PPAYγ基因的内源性LVPPARg-RNAi病毒。待细胞再次生长融合至70%左右时,正常对照组不做任何处理,放置于培养箱中培养;缺氧损伤组、过表达组以及沉默组放置于含95%N2和5%CO2混合气体缺氧小室中,密封缺氧培养48 h。采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞中PPARγ、受体交互作用蛋白1(RIP1)、RIP3、转化生长因子-β(TGF-β)mRNA,采用Westernblotting法检测各组细胞中PPARγ、RIP1、RIP3、TGF-β蛋白。结果与对照组相比,缺氧损伤组、过表达组、沉默组细胞中PPARγ的mRNA及蛋白相对表达量均显著降低(P均<0.05),RIP1、RIP3、TGF-β的mRNA及蛋白相对表达量均显著升高(P均<0.05)。与缺氧损伤组相比,过表达组细胞中PPARγ的mRNA及蛋白相对表达量均显著升高(P均<0.05),RIP1、RIP3、TGF-β的mRNA及蛋白相对表达量均显著降低(P均<0.05);沉默组细胞中PPARγ的mRNA及蛋白相对表达量均显著降低(P均<0.05),RIP1、RIP3、TGF-β的mRNA及蛋白相对表达量均显著升高(P均<0.05)。结论在缺氧诱导的RTEC坏死性凋亡中,PPARγ基因表达降低;过表达PPARγ基因对缺氧诱导的RTEC坏死性凋亡有抑制作用,而沉默PPARγ基因则有促进作用。
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