中药黄芪蛋白抗肝癌细胞HepG2作用机制

作者：王禹璇; 刘海英; 姚红; 张华凤^*; 薛慧清^*

来源：药学学报, 2020, 55(02): 241-246.

DOI：10.16438/j.0513-4870.2019-0684

• 黄芪蛋白
• 程序性细胞死亡
• RNA测序
• p53
• RIP1

本文考察了黄芪蛋白对肝癌细胞HepG2的增殖抑制作用,结合转录组学探讨黄芪蛋白抗肿瘤作用机制。黄芪干燥根部经硫酸铵沉淀,得到分子质量大小不一的黄芪蛋白(Huang Qi protein, HQP)。通过血球计数法检测黄芪蛋白对肿瘤细胞HepG2的影响及其毒性作用;结合流式细胞术和Hoechst/propidium iodide (PI)双染测定细胞死亡情况; Western blot测定坏死标志蛋白受体相互作用的丝氨酸/苏氨酸激酶1 (RIP1);将对照组与加药组RNA进行转录组测序,对RNA测序(RNA-seq)结果进行差异表达基因分析; qRT-PCR验证候选基因mRNA相对表达量。结果表明,随着HQP浓度增加,对肝癌细胞HepG2增殖抑制作用愈加明显,当HQP质量浓度为100μg·mL-1时,细胞坏死率增加到18.78%,同时在显微镜下观察到PI单染的红色坏死细胞增多, Western blot结果显示RIP1蛋白水平增加。RNA-seq结果分析得到2.6万个相关基因受HQP调控,其中979个基因受调控较明显。KEGG分析发现部分差异表达基因与p53信号通路相关, qRT-PCR验证测序结果可靠。黄芪蛋白使HepG2细胞发生程序性坏死可能与p53信号通路有关。

• 单位
  山西中医药大学; 生命科学学院; 中国科学技术大学