Nup88通过钙调蛋白调控乳腺癌细胞侵袭能力

作者：管明丽^*; 孙美涛; 阮华娟; 俞利辉

来源：中国优生与遗传杂志, 2023, 31(08): 1539-1544.

DOI：10.13404/j.cnki.cjbhh.2023.08.031

• Nup88基因
• 侵袭
• 乳腺癌
• 基质金属蛋白酶
• 钙结合蛋白

目的 探讨核孔蛋白88kDa(Nup88)基因影响乳腺癌细胞系BT-20细胞侵袭能力的分子机制。方法 敲低Nup88基因后，通过Transwell和划痕实验检测细胞的侵袭能力，通过TMT标记的定量蛋白质组技术，采用流式细胞术检测Nup88敲低细胞的钙离子水平，通过明胶酶谱实验检测Nup88敲低表达后，乳腺癌BT-20细胞分泌基质金属蛋白酶2(MMP2)和MMP9的情况。通过pull-down试验寻找并验证与Nup88存在相互作用的蛋白。结果 敲低Nup88基因表达后，细胞培养48h后，划痕愈合率低于对照组，穿膜细胞数量亦显著低于对照组，BT-20细胞的迁移能力减弱。蛋白质组学分析得到差异蛋白247个，其中Nup88基因敲低细胞株的Nup88蛋白表达水平降低约48%。GO分析表明，敲低Nup88的表达可能影响了钙结合相关蛋白的表达。细胞实验结果表明，细胞中钙离子含量显著降低，分泌MMP2和MMP9的活性显著低于阴性对照组细胞（P<0.05）。Pull-down结果证实Nup88与多个钙结合蛋白存在相互作用，可能通过二硫键与钙结合蛋白39(CAB39)相同作用，共同调控钙离子水平。结论 Nup88可能通过与CAB39结合，调节胞内钙离子含量，调节基质金属蛋白酶的活性，进而影响肿瘤细胞的侵袭能力。

• 单位
  杭州医学院