实验设计在重组人生长激素-Fc融合蛋白纯化工艺建立过程中的应用

作者：毕江坤; 俞露; 张宇; 张五妮; 李利; 刘涵

来源：中国生物制品学杂志, 2023, 36(03): 336-340.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.003841

• 实验设计
• 重组人生长激素-Fc
• 宿主蛋白
• 纯化

目的 通过实验设计(Design of Experiment,DOE)对重组人生长激素-Fc(recombinant human growth hormone-Fc,rhGH-Fc)融合蛋白纯化工艺中阴离子交换层析的层析条件进行优化，以降低蛋白原液中宿主蛋白(host cell protein,HCP)含量。方法 利用Minitab 19中DOE功能创建4因子2水平完全析因实验设计，通过DOE对rhGH-Fc纯化工艺中离子交换层析条件(流速、上样量、缓冲液pH、洗脱液盐浓度)进行优化，找出操作空间。结果 建立的DOE模型能准确预测实验结果，其中上样量、缓冲液pH、洗脱盐浓度以及缓冲液pH与洗脱液盐浓度的交互效应对收获液中HCP含量有显著影响。获得的最佳层析条件为：上样量15 mg/mL，流速120 cm/h，洗脱液pH 7.0～8.0，洗脱液盐浓度0.1 mol/L。该层析条件下洗脱液中HCP含量均<400 ng/mg，在确定操作空间的结果范围内满足验证要求。结论 本实验成功应用DOE确定了阴离子交换层析去除HCP的最佳层析条件，为其在生物制药领域的更多应用提供了参考。

• 单位
  长春生物制品研究所