摘要
目的通过Notch信号通路探讨鳖甲煎丸干预骨髓间充质干细胞(BMSCs)的作用机制,为鳖甲煎丸干预BMSCs移植治疗肝脏疾病提供理论依据。方法体外分离培养大鼠BMSCs,取第3代BMSCs随机分为空白对照组、肝细胞生长因子联合成纤维生长因子-4(HGF加FGF-4)组、鳖甲煎丸组、HGF加FGF-4联合鳖甲煎丸联合组,采用免疫细胞化学法检测Notch-1,ALB表达变化,用RT-PCR方法检测Notch1 mRNA表达变化。结果 (1)随着诱导时间的延长,白蛋白的阳性细胞率呈上升趋势,在相同时间点比较,各培养组与空白对照组相比,有显著差异(P<0.05或P<0.01);在诱导后21d、28d比较,鳖甲煎丸组的ALB阳性细胞率与HGF加FGF-4组相比,差异有显著性(P<0.05或P<0.01),其中HGF加FGF-4联合鳖甲煎丸组在诱导后第14天开始,其ALB阳性细胞率持续比HGF加FGF-4组高(P<0.05或P<0.01)。(2)各组Notch1蛋白阳性细胞表达率在14天后达到峰值,随之逐渐下降,在14d、21d、28d相同时间点比较,各培养组均高于空白对照组,有显著性差异。(P<0.01)。(3)各组Notch-1mRNA在14天后达到峰值,随之下降,其中在诱导后14d、21d、28d比较,鳖甲煎丸组及HGF加FGF-4联合鳖甲煎丸组中Notch-1 mRNA表达均高于空白对照组,差异有显著性(P<0.01)。在诱导后21d、28d,鳖甲煎丸组及HGF加FGF-4联合鳖甲煎丸组的Notch1 mRNA表达均高于HGF加FGF-4组,差异有显著性(P<0.01)。结论鳖甲煎丸能促进BMSCs分化为肝样细胞,其作用机制可能与调节BMSCs Notch信号通路中Notch-1蛋白以及Notch-1mRNA表达水平有关。
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单位广西中医药大学第一附属医院; 广西中医药大学