SFTS病毒非结构蛋白重组质粒的构建及其体液免疫原性研究

作者：艾宇洁; 韩亚萍; 金柯; 岳明; 周宜庆; 李军^*

来源：中华实验和临床病毒学杂志, 2017, 31(03): 240-244.

• SFTS病毒
• 非结构蛋白
• 重组质粒
• 体液免疫应答

目的研究SFTS病毒(SFTS virus, SFTSV)的非结构蛋白(Nonstructural proteins, NSs)重组质粒的体液免疫原性。方法利用聚合酶链反应法(Polymerase chain reaction, PCR)构建真核表达质粒pJW4303-NSs、pJW4303-NSs-opt、pJW4303-NSs-Flag;引入NheⅠ酶切位点及tPA(Tissue plasminogen activator, tPA)信号肽, 构建质粒pJW4303-tPA-NSs-opt。将质粒转染至HEK 293T细胞, 蛋白质印迹法(Western blot, WB)验证NSs表达。NSs相关质粒免疫BALB/c小鼠, 采用酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测SFTSV NSs特异性IgG抗体。结果成功构建了重组NSs质粒, WB验证了NSs可在HEK293T细胞内表达。pJW4303-NSs、pJW4303-NSs-opt、pJW4303-tPA-NSs-opt重组质粒均可诱导小鼠体内产生特异性IgG, 其中单优化型质粒pJW4303-NSs-opt的免疫原性较好, 在第6、8周的IgG水平显著高于野生型NSs质粒, 差异具有统计学意义。结论本研究构建的SFTSV的NSs重组优化型质粒具有良好体液免疫原性, 其中单优化型效果最佳。

• 单位
  南京医科大学第一附属医院