ALG3通过JAK/STAT通路促进三阴性乳腺癌增殖、侵袭和迁移

作者：邢现菲; 李瑞华; 韩亚娟; 张竞竞; 邵渝欢; 马赛菲; 刘亚萌; 韩正全^*

来源：山西医科大学学报, 2023, 54(05): 580-588.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2023.05.003

• ALG3
• JAK/STAT通路
• 三阴性乳腺癌
• MDA-MB-231细胞
• 裸鼠

目的 探讨ALG3对乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移以及JAK/STAT信号通路的影响。方法 Western blot检测正常人乳腺上皮细胞HBL-100和乳腺癌细胞株SKBr3、MCF-7、MDA-MB-231中ALG3的表达情况。Western blot检测过表达和敲减序列的转染效率。先将实验分为control组(Lip 2000)、NC-KD组(Lip 2000+si-NC)和ALG3-KD组(Lip 2000+ALG3-siRNA),CCK-8,集落克隆和体内裸鼠成瘤实验检测乳腺癌细胞增殖能力；划痕实验和Transwell实验检测乳腺癌细胞侵袭和迁移能力；Western blot检测JAK/STAT通路相关蛋白JAK2/p-JAK2、STAT3/p-STAT3、MMP2、Cyclin D1、Bax表达情况。再将实验分为NC-OE组(Lip 2000+mimic-NC)、ALG3-OE组(Lip 2000+ALG3-mimic)和ALG3-OE+WP1066组(Lip 2000+ALG3-mimic+通路抑制剂WP1066),Western blot检测WP1066对JAK/STAT通路相关蛋白JAK2/p-JAK2、STAT3/p-STAT3的影响，集落克隆和Transwell实验检测抑制该通路后，ALG3对乳腺癌细胞增殖和侵袭迁移能力的影响。结果 与正常人乳腺上皮细胞HBL-100相比，ALG3在SKBr3、MCF-7、MDA-MB-231细胞中的表达较高，以MDA-MB-231细胞中的升高水平最显著(P<0.05),用于后续实验。与control组和NC-KD/OE组相比，ALG3-S3组ALG3敲减效率最佳，ALG3-mimic组过表达差异具有统计学意义(P<0.01),故用于后续敲减和过表达。与control组和NC-KD组相比，ALG3-KD组MDA-MB-231细胞增殖和侵袭迁移能力受到抑制(P<0.05),JAK/STAT通路相关蛋白JAK2/p-JAK2、STAT3/p-STAT3、MMP2、Cyclin D1的表达水平下降，凋亡相关蛋白Bax升高(P<0.05)。与NC-OE和ALG3-OE组相比，ALG3-OE+WP1066组JAK/STAT通路相关蛋白JAK2/p-JAK2、STAT3/p-STAT3及其磷酸化受到抑制(P<0.05),同时，乳腺癌细胞的增殖和侵袭迁移能力也被抑制(P<0.05)。结论 ALG3可能通过激活JAK/STAT通路促进三阴性乳腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移。

• 单位
  蚌埠医学院第一附属医院