葡萄细胞分裂素响应调节因子VlRRA1的克隆、表达及启动子活性分析

作者：李松琦; 李旭飞; 李敏; 刘海楠; 裴茂松; 韦同路; 郭大龙; 余义和^*

来源：园艺学报, 2023, 50(08): 1609-1621.

DOI：10.16420/j.issn.0513-353x.2022-0516

• 葡萄
• 细胞分裂素
• 细胞分裂素响应调节因子
• VlRRA1
• 启动子活性

在‘巨峰’葡萄中克隆获得细胞分裂素响应调节因子VlRRA1及其启动子，分析了VlRRA1的表达特征，并对其启动子进行活性分析。结果显示，VlRRA1的cDNA全长为666 bp，编码221个氨基酸；保守结构域预测结果显示该基因仅含有1个磷酸接受结构域（REC），属于A型RR基因；系统进化关系表明VlRRA1与其他物种中的A型RR亲缘关系较近。酵母自激活试验说明VlRRA1不具有转录激活活性，符合A型RR基因的典型特征。qRT-PCR结果表明VlRRA1具有组织表达特异性，主要在茎、叶以及幼果中表达；外源细胞分裂素氯吡苯脲（CPPU）可以促进VlRRA1的表达，而细胞分裂素生物合成抑制剂洛伐他汀（lovastatin,LOV）则抑制VlRRA1的转录。VlRRA1启动子上有多种与非生物胁迫和激素响应相关的元件。GUS组织染色的结果表明，VlRRA1启动子具有活性，可以响应多种激素信号，包括与坐果相关的细胞分裂素、生长素和赤霉素。以上结果表明VlRRA1在细胞分裂素介导的葡萄坐果与幼果发育中具有重要作用。

• 单位
  园艺与植物保护学院; 河南科技大学