一种优化的大白菜线粒体DNA提取方法

作者：李振兴; 张德双; 司龙亭; 于拴仓; 张凤兰; 余阳俊; 赵岫云; 汪维红

来源：华北农学报, 2011, (02): 138-142.

• 大白菜
• 线粒体DNA
• 提取方法
• 变温处理
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• Isolation
• Poecilothermal treatments
• CMS

介绍了一种快速、大量提取大白菜线粒体DNA的方法。以大白菜黄化苗为试验材料,通过加入一定量的DNaseⅠ和RNase A酶,充分消除核基因组DNA和RNA的污染。通过加入蛋白酶K和SDS,并经2步变温处理,即先在50℃条件下温育1 h,接着在37℃条件下温育1 h,有效地提高了mtDNA产出率。经凝胶电泳和PCR等检测,结果表明:mtDNA电泳条带清晰,OD260与OD280比值为1.8左右,纯度较高;利用细胞核看家基因Actin设计引物,扩增mtDNA,没有获得扩增产物,表明mtDNA中没有核基因组污染;利用大白菜CMS96胞质不育系基因orf222设计引物,扩增不育系和保持系mtDNA,仅...

• 单位
  沈阳农业大学; 北京市农林科学院蔬菜研究中心