猪口蹄疫病毒受体整合素β8亚基配体结合域的原核表达和多克隆抗体制备

作者：独军政; 高闪电; 常惠芸; 赵建勇; 丛国正; 邵军军; 林彤; 才学鹏

来源：甘肃农业大学学报, 2008, (03): 8-12.

DOI：10.13432/j.cnki.jgsau.2008.03.018

• 猪
• 口蹄疫病毒受体
• β8亚基配体
• 结合域
• 原核表达
• 多克隆抗体 porcine
• FMDV receptor
• integrin β8 subunit
• ligand binding domain
• prokaryotic expression
• polyclonal antibody

病毒受体是决定病毒宿主特异性和组织嗜性的重要因素.利用原核细胞表达了猪口蹄疫病毒受体整合素β8亚基的配体结合域(LBD)片段,分离纯化目的蛋白后免疫兔,制备兔多克隆抗体.以含有猪β8亚基全长cD-NA的质粒为模板,经PCR扩增得到位于β8成熟肽氨基端的LBD基因片段,与带有GST标签的原核表达载体pGEX 4T-1相连,构建原核表达质粒pGEX/β8LBD,测序确认读码框正确后,将其转化感受态细胞BL21(DE3),以IPTG诱导表达重组β8LBD融合蛋白.通过SDS-PAGE和Western blot鉴定后提取包涵体,以电泳分离纯化的重组融合蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,鉴定血清效价和特...

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 农业部; 中国农业科学院兰州兽医研究所