汉滩病毒M片段噬菌体表位文库的构建及筛选

作者：罗保君; 石英; 常国辉; 张秀娟; 周育森

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2006, (08): 752-755.

• 构建及筛选
• 汉滩病毒M片段
• 噬菌体文库 Construction and panning
• Hantaan virus M fragment
• Phage library

目的通过构建汉滩病毒M片段的噬菌体展示文库,筛选汉滩病毒包膜蛋白的抗原表位。方法DNaseⅠ随机消化的M片段与载体pComb3连接,转化宿主XL-1Blue,在辅助噬菌体VCSM13存在的条件下,获得M片段的随机噬菌体文库。利用纯化的恢复期病人血清对M片段噬菌体文库进行3轮淘洗,通过ELISA、序列分析对所获得的克隆进行鉴定。并对其中2个阳性克隆的目的片段进行了原核表达和免疫原性分析。结果筛选获得的5个阳性噬菌体克隆均位于G1蛋白编码区,原核表达的2个阳性克隆片段蛋白免疫兔,免疫兔血清能与病毒抗原发生特异反应。结论本技术路线可用于汉滩病毒包膜蛋白抗原表位的研究,为汉滩病毒诊断试剂的研制、亚单位...

• 单位
  军事医学科学院; 病原微生物生物安全国家重点实验室