基于方证相关探寻肾阳虚证物质基础的蛋白质组学研究

作者:梁华; 王燕; 朱明雪; 西旺; 李泽光*
来源:中华中医药学刊, 2020, 38(12): 10-275.
DOI:10.13193/j.issn.1673-7717.2020.12.002

摘要

目的基于中医方证相关理论,采用iTRAQ技术筛选衰老进程中虚证相关差异蛋白变化,以金匮肾气丸干预衰老小鼠,以方测证模式探寻阳虚证的物质基础。方法选用30只自然衰老雄性小鼠为研究对象,3月龄小鼠10只为青年组,剩余小鼠饲养至20月龄后随机分为老龄组和金匮肾气丸组,每组各10只。金匮肾气丸组灌胃给药剂量为10.53 g/kg,其余两组给予等量生理盐水。摘取小鼠肝脏组织,以蛋白滤膜辅助酶解方法进行酶解,之后iTRAQ标记,采用Easy nLC1000和orbitrap Elite液质联用平台对iTRAQ标记样品进行数据采集,经数据库UniProt release 201607筛选,使用Significant B算法利用余补误差函数,以Foldchange>1.2或<0.83,且P<0.05进行差异蛋白的筛选,鉴定出的差异蛋白进行生物信息学分析。结果青年组与老龄组共鉴定出995个差异蛋白;老龄组与金匮肾气丸组共鉴定出674个差异蛋白,发现79个差异蛋白在金匮肾气丸给药后回调。结论金匮肾气丸回调的差异蛋白主要富集在破骨细胞分化、癌症中心碳代谢、氨酰-tRNA生物合成、补体途径和花生四烯酸代谢通路中。