M2型巨噬细胞来源的外泌体lncRNA NR＿028113.1通过激活JAK2/STAT3通路促进巨噬细胞的极化

作者：张梦莹; 李志; 裴纬亚; 李雪琴; 杨辉; 朱小龙; 吕坤^*

来源：南方医科大学学报, 2023, 43(03): 393-399.

• 外泌体
• lncRNA
• 巨噬细胞极化
• JAK2
• STAT3

目的 探究M2型巨噬细胞来源的外泌体lncRNA NR＿028113.1对巨噬细胞极化的影响及机制。方法 体外分离并培养BALB/c小鼠骨髓来源的巨噬细胞（BMDMs）,IL-4诱导其向M2型巨噬细胞极化后，提取并鉴定M2细胞上清液所分泌的外泌体exosome(M2-exo),q RT-PCR检测M2外泌体中lncRNA的表达。将100μg/mL的M2-exo，对照组用等体积的PBS分别与M0巨噬细胞共孵育48 h后，qRT-PCR及Western blot检测各组细胞中Arg1、YM-1、FIZZ1、iNOS和TNF-α的表达，流式细胞术检测CD206+细胞比例，Western blot检测各组细胞JAK2/STAT3蛋白磷酸化水平。设计、合成lncRNA smart silencer特异性抑制lncRNA NR＿028113.1的表达，转染M2细胞48 h后提取各组细胞（exo+NC和exo+smart silencer）上清液分泌的外泌体再与M0型巨噬细胞共孵育，检测孵育后各组细胞中Arg1、YM-1、FIZZ1、iNOS和TNF-α的表达以及CD206+细胞比例和JAK2/STAT3信号通路蛋白磷酸化水平。结果 lncRNA NR＿028113.1在M2型巨噬细胞外泌体中高表达（P<0.05）。相比于PBS对照组，与M2-exo共培养的M0巨噬细胞中Arg1、YM-1和FIZZ1表达均显著上调（P<0.05）,iNOS和TNF-α表达显著下调（P<0.05）,CD206+细胞所占比例显著增加（P<0.01）,JAK2/STAT3蛋白磷酸化水平显著增加（P<0.05）。抑制M2-exo中lncRNA NR＿028113.1的表达后，共培养的M0巨噬细胞中Arg1、YM-1和FIZZ1表达显著下调（P<0.05）,iNOS和TNF-α表达显著上调（P<0.05）,CD206+细胞所占比例显著减少（P<0.05）,JAK2/STAT3蛋白磷酸化水平显著减少（P<0.05）。结论 M2型巨噬细胞来源的外泌体lncRNA NR＿028113.1可显著促进巨噬细胞向M2型极化，其机制可能与激活JAK2/STAT3信号通路相关。

• 单位
  皖南医学院弋矶山医院; 中心实验室; 皖南医学院