西番莲TeMV和CMV双重RT-PCR检测体系的建立及应用

作者：焦楠; 朱宁; 程春振; 林玉玲; 李汉生; 陈发兴; 赖钟雄^*

来源：果树学报, 2019, 36(07): 947-953.

DOI：10.13925/j.cnki.gsxb.20190012

• 西番莲
• 夜来香花叶病毒
• 黄瓜花叶病毒
• 病毒检测
• 双重RT-PCR技术

【目的】建立西番莲夜来香花叶病毒(Telosma mosaic virus, TeMV)和黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)的双重RT-PCR检测体系。【方法】根据TeMV和CMV的外壳蛋白(coat protein, CP)基因序列,分别设计两对特异性引物,并对引物组合浓度、退火温度和循环次数进行优化。【结果】优化结果显示:TeMV和CMV最佳引物组合浓度分别为2.0 mmol·L-1和8.0 mmol·L-1;最佳退火温度为57℃;最佳循环次数为35次。【结论】灵敏度分析结果显示,在样品c DNA原液稀释到10-5时,仍能检测到两种病毒扩增出的目的条带。同时,以健康组培苗作为对照组,应用建立的双重RT-PCR检测技术对采集于福建省不同产地的36份西番莲样品进行了病毒检测,发现有8份样品同时感染两种病毒,8份样品仅感染TeMV,10份样品仅感染CMV。本研究可为西番莲TeMV和CMV的检测提供便利。

• 单位
  福建农林大学