筛选肝细胞p53启动子结合蛋白的噬菌体表面展示技术

作者：吴顺华; 钟彦伟; 成军; 郑玉建

来源：环境与健康杂志, 2011, (07): 588-591.

DOI：10.16241/j.cnki.1001-5914.2011.07.029

• 噬菌体表面展示技术
• p53
• 肝细胞 Phage display
• p53
• Liver cell

目的筛选p53启动子结合蛋白,探讨p53对肝细胞调节的分子生物学机制。方法应用噬菌体表面展示技术,以p53作为固相筛选分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行5轮"吸附-洗脱-扩增"过程,经噬斑的PCR扩增后,构建克隆载体,最后对所筛选克隆进行DNA测序和生物信息学分析。结果噬菌体经5轮富集后,成功构建了噬菌体p53展示文库,该文库包含与p53结合的肝细胞蛋白有17种。其中2个克隆编码未知功能蛋白;其余的克隆分别编码人α2HS糖蛋白(AHSG)、人D4、锌指蛋白家族2(DPF2)、凋亡反应锌指基因(REQ)、Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制因子结合蛋白、氨基甲酰磷酸合成酶1、磷酸化酶激酶、酪氨酸氨基转移酶...

• 单位
  北京地坛医院; 新疆医科大学; 解放军第302医院