重组鸡白介素2和干扰素α融合蛋白的表达及生物学活性的检测

作者：苗天姿; 赵款; 雷白时; 张武超; 庞敬红; 梁飞; 袁万哲^*; 汪恩强^*

来源：河北农业大学学报, 2021, 44(06): 85-91.

DOI：10.13320/j.cnki.jauh.2021.0106

• 鸡IL-2
• 鸡IFN-α
• 融合蛋白
• 抗病毒
• 干扰素刺激基因

为表达鸡的白介素-2(Interleukin-2,IL-2)和干扰素α(Interferon-α,IFN-α)融合蛋白,并进一步探究融合蛋白的生物学活性,本试验根据GenBank登录的鸡IL-2和IFN-α基因序列,使用linker连接成为嵌合基因,合成pET-32a-rChIL-2-IFN-α原核表达载体,转化至大肠杆菌BL21(DE3)经IPTG诱导表达。通过MTT法检测重组融合蛋白促鸡外周血淋巴细胞(PBLC)增殖活性;通过细胞病变抑制法检测重组融合蛋白在鸡胚成纤维细胞(CEF)上的抗病毒活性;通过RT-qPCR检测了融合蛋白对干扰素刺激基因和内源性干扰素的作用。结果表明,重组融合蛋白促PBLC增殖活性效果显著,在CEF上具有抗VSV活性;重组融合蛋白能够显著地上调CEF中5种干扰素刺激基因和内源性干扰素的mRNA转录水平。综上所述,本试验表达的重组融合蛋白具有促淋巴细胞增殖活性和抗病毒作用,试验结果为进一步探究融合蛋白在鸡体内的活性奠定了基础。

• 单位
  河北农业大学