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摘要
目的探讨核苷酸结合寡聚化结构域1(NOD1)调控肝细胞凋亡对小鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响。方法建立缺血再灌注损伤动物模型, 选择健康、雄性、清洁级C57 BL小鼠30只, 完全随机法分为假手术组和缺血再灌注组(IR2 h、6 h、12 h、24 h), 每组6只。血生化检测每组小鼠血清ALT、AST水平, 采用HE染色及原位末端标记法(TUNEL法)观察肝脏病理学改变及肝细胞凋亡情况, 免疫组化检测各组肝组织NOD1的表达与分布, 蛋白质印迹(Western blot)检测NOD1、AIM2、pro-Capase-1、active-Caspase-1的表达情况, 在AML12细胞中转染NOD1 siRNA及空载对照siRNA, 建立细胞缺氧/复氧模型并收集细胞检测NOD1、AIM2、active-Caspase-1表达。结果 IR各组的ALT、AST均比假手术组高, 且在IR12 h时达到峰值(P<0.05)。病理检查结果显示再灌注12 h时肝损伤最重, TUNEL结果显示再灌注12 h时凋亡细胞数最多。免疫组化结果显示12 h时NOD1表达最多。Western blot显示再灌注12 h时后NOD1的蛋白表达最高。随着再灌注时间的延长, AIM2、active-Caspase-1的表达逐渐增多, pro-Caspase-1的表达逐渐减少。AML12细胞转染NOD1 siRNA后, NOD1、AIM2及active-Caspase-1表达减少。结论 NOD1促进肝脏缺血再灌注损伤, 这可能与NOD1通过激活细胞凋亡促进肝脏损伤有关。
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