黄芩茎叶黄酮干预冈田酸引起的大鼠皮层多个tau蛋白磷酸化位点的作用研究

作者：高杨; 马帅; 商亚珍^*

来源：神经药理学报, 2018, 8(06): 30-31.

• tau
• 黄芩茎叶黄酮
• 磷酸化位点
• 冈田酸
• 作用研究

目的:探讨黄芩茎叶黄酮(SSF)对冈田酸(OA)引起的大鼠皮层tau蛋白多位点磷酸化的干预作用。方法:60只雄性健康SD大鼠,腹腔注射10%水合氯醛(300 mg·kg-1)麻醉,常规消毒,并置于大鼠脑立体定位仪上仰卧位固定,颅顶正中矢状切开,暴露硬脑膜并标记前囟点。前囟点为坐标原点,于其后0.8 mm、中线右侧旁开1.3 mm确认入针点,钻一直径为0.2 mm孔,进针点垂直插入带内芯的穿刺套管,插入3.5 mm缓慢旋出导管内芯直至见脑脊液溢出后将其置回。以牙托粉固定穿刺套管,缝合头部皮肤并消毒,分两次注入200 ng·kg-1 OA(10%DMSO生理盐水溶解配制),间隔3 d。按同样方法注入等体积的10%DMSO生理盐水对照液制备假手术组。末次注射后分笼恢复饲养21 d,以Morris水迷宫进行记忆障碍模型筛选,模型成功大鼠连续灌胃SSF 25、50和100 mg·kg-1 36 d,Western blotting检测皮层中p-tau(Thr181)/p-tau(Thr205)/p-tau(Thr212)/p-tau(Thr217)/p-tau(Ser235)的蛋白表达水平。结果:脑室注射OA可使大鼠皮层中p-tau(Thr181)/p-tau(Thr205)/p-tau(Thr212)/p-tau(Thr217)/p-tau(Ser235)蛋白表达水平明显增加(P<0.01,P<0.05)。与假手术组比较,模型组p-tau(Thr181)、p-tau(Thr205)、p-tau(Thr212)、p-tau(Thr217)、p-tau(Ser235)蛋白表达分别增加了27.48%(P<0.01)、36.85%(P<0.01)、44.43%(P<0.01)、1.91%、535.10%(P<0.01)。三剂量SSF可不同程度地逆转OA所致大鼠皮层中上述几个磷酸化tau蛋白表达的增加。与模型组比较,三剂量SSF使p-tau(Thr181)蛋白水平分别上升了15.43%(25 mg·kg-1,P<0.01),下降了19.92%(50 mg·kg-1,P<0.01)和7.84%(100 mg·kg-1,P<0.05);使p-tau(Thr205)蛋白水平分别下降了63.85%(25 mg·kg-1,P<0.01)、64.82%(50 mg·kg-1,P<0.01)和61.35%(100 mg·kg-1,P<0.01);使p-tau(Thr212)蛋白水平分别下降了64.49%(25 mg·kg-1,P<0.01)、66.14%(50 mg·kg-1,P<0.01)和51.62%(100 mg·kg-1,P<0.01);使p-tau(Thr217)蛋白水平分别下降了100%(25 mg·kg-1,P<0.01)、11.05%(50 mg·kg-1,P<0.01)和35.34%(100 mg·kg-1,P<0.01),使p-tau(Ser235)蛋白水平分别下降了24.14%(25 mg·kg-1,P<0.01)、46.25%(50 mg·kg-1,P<0.01)和100%(100 mg·kg-1,P<0.01)。结论:脑室注射OA可引起大鼠皮层中tau蛋白Thr181、Thr205、Thr212、Thr217、Ser235位点磷酸化增加,SSF可不同程度的逆转OA所致上述位点tau蛋白过度磷酸化,结合本实验室以往的研究SSF能够改善脑室注射OA所致记忆障碍和减少OA引起的脑内NFT生成,表明SSF改善记忆障碍和抑制脑内NFT增多可能与SSF抑制tau蛋白Thr181、Thr205、Thr212、Thr217和Ser235位点磷酸化有关,提示SBF抑制tau蛋白磷酸化减少脑内NFT沉积可能是有利于AD的治疗。

• 单位
  承德医学院