不同代次人脐带间充质干细胞生物学特性评估

作者：林惠珠; 李翠平; 钱师宇; 阳莉; 陈晓燕; 陈文捷; 卢建溪^*

来源：中国组织化学与细胞化学杂志, 2022, 31(04): 341-350.

DOI：10.16705/j.cnki.1004-1850.2022.04.003

• 人脐带间充质干细胞
• 染色体核型分析
• β-半乳糖苷酶活性
• 细胞因子

目的 明确传代扩增代次对人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs）生物学特性的影响。方法 采用组织块法分离HUC-MSCs,体外传代培养后比较P3、P5、P10细胞的生物学特性：采用细胞计数法与流式细胞仪检测细胞增殖活性和表面免疫标志物；染色体核型分析检测基因稳定性；成脂、成骨诱导分化检测多向分化潜能；SA-β-gal活性检测细胞衰老情况；蛋白芯片检测胞内及培养上清细胞因子表达水平。结果 3个代次的hUC-MSCs形态特征及生长曲线相似，随着扩增代次的增加，细胞的增殖活性降低。3个代次的hUC-MSCs均高表达CD105、CD90、CD73等表面免疫标志物，不表达或低表达CD11b、CD19、CD34、CD45及HLA-DR。染色体核型分析证实3个代次的hUCMSCs均为正常二倍体核型,染色体核型未发生结构畸形改变。3个代次的hUC-MSCs成脂和成骨分化潜能均未见显著性差异。SA-β-gal活性检测显示,随着扩增代次的增加, HUC-MSCs开始呈现衰老趋势。hUC-MSCs胞内及培养上清均能检测到IL-6、IL-1β、TNF-α、G-CSF和GM-CSF，胞内IL-6和IL-1β随着扩增代次增加升高；培养上清GM-CSF随着扩增代次增加下降。结论 不同代次HUC-MSCs在表面免疫标志物、基因稳定性及其多向分化潜能等基本生物学特性方面均无显著性变化。随着扩增代次增加会分泌SASP，而致细胞老化,增殖活性降低。

• 单位
  中山大学附属第三医院; 公共卫生学院; 暨南大学