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摘要
为探究联吡啶类除草剂敌草快（DQ）对鸡卵巢组织结构及繁殖性能相关基因表达的影响，拟利用不同剂量的DQ诱导母鸡发生氧化应激，本实验将60只180日龄的雌性康乐黄母鸡随机平均分为对照组和5、15、20 mg/kg DQ组，不同浓度的DQ处理组鸡均采用一次性腹腔注射的方法进行处理。21 d后颈动脉放血处死，迅速采集鸡卵巢组织样品。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测氧化应激相关基因Nrf2、HO-1和Gpx1的表达水平，利用组织抗氧化功能检测试剂盒检测鸡卵巢过氧化氢酶（CAT）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性及丙二醛（MDA）浓度变化情况，利用HE染色法检测氧化应激对卵巢组织结构的影响，利用Western blot技术分别检测B-细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）和半胱氨酸蛋白酶3(Caspase3)的蛋白表达量变化，通过qRT-PCR和Western blot技术分别检测母鸡繁殖性能相关基因ZP2和Wnt4的mRNA和蛋白的表达量变化。结果表明：与对照组相比，敌草快组卵巢组织中氧化应激相关分子HO-1、Nrf2和Gpx1的mRNA表达量均下调（P<0.05）,CAT和T-SOD酶活性降低（P<0.05），且MDA浓度升高（P<0.05）;HE染色结果显示，鸡卵巢经DQ作用后，卵泡发育受阻，卵泡颗粒细胞排列稀疏，20mg/kgDQ组出现大量闭锁卵泡，促凋亡相关蛋白Bax和Caspase3的蛋白表达量上调（P<0.05），而20 mg/kg DQ组抗凋亡蛋白Bcl-2下调（P<0.05），且Bax/Bcl-2的比率上调（P<0.05）；基因ZP2和Wnt4的mRNA及蛋白表达量均下调（P<0.05）。由此可见，DQ能够诱导鸡卵巢组织发生氧化应激，提升卵巢组织细胞凋亡程度，抑制卵泡发育及繁殖性能相关基因的表达。本研究可为进一步探究联吡啶类除草剂对母鸡繁殖性能损伤的具体作用机制提供理论依据。
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单位宜春学院; 生命科学与资源环境学院
