摘要
目的 探究敦煌芮草膏对冻伤的治疗作用及机制。方法 将96只SPF级SD大鼠用随机数字表法分为6组,每组16只。除空白组之外,剩余80只大鼠采用液氮冷冻法造模,分为5组,即模型(M)组,敦煌芮草膏低(DRP-L)、中(DRP-M)、高剂量(DRP-H)组,磺胺嘧啶银乳膏(SSC)组。除空白组外,其余组每日擦涂给药。于造模后第3、7天取材,每组8只。检测冻伤大鼠皮损大体情况、创口愈合率、肿胀率、病理检查;ELISA法检测大鼠血清中促炎因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、血管内皮生长因子(VEGF)表达;采用实时荧光定量PCR、Western Blot法检测局部创面组织中Toll样受体4(TLR4),髓样分化因子88(MyD88),核转录因子κB p65(NF-κB p65) mRNA及蛋白表达。结果 与空白组比较,第3、7天,M组大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量及VEGF表达量均明显升高(P<0.05),创面组织中TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达增高(P<0.05),M组大鼠炎症反应明显。与M组比较,在造模第3天,DRP-L组NF-κB mRNA水平及MyD88蛋白水平降低(P<0.05);DRP-M、DRP-H、SSC组TNF-α、IL-6含量及TLR4、MyD88 mRNA和蛋白水平(P<0.05,P<0.01)及NF-κB、p-NF-κB蛋白水平降低(P<0.05,P<0.01);且SSC组可IL-1β含量降低(P<0.05),VEGF水平升高(P<0.05),NF-κB mRNA水平降低(P<0.05)。造模第7天,DRP-L组可TNF-α、IL-6含量降低(P<0.05),VEGF水平升高(P<0.01),NF-κB mRNA表达水平降低(P<0.05),MyD88、p-NF-κB蛋白水平降低(P<0.01);DRP-M、H组TNF-α、IL-1β、IL-6水平(P<0.05,P<0.01),升高VEGF水平(P<0.01);降低TLR4、MyD88、NF-κB mRNA及蛋白水平降低(P<0.05,P<0.01);SSC组IL-1β降低(P<0.05),VEGF水平升高(P<0.01),NF-κB mRNA水平降低,MyD88、NF-κB、p-NF-κB蛋白水平降低(P<0.05,P<0.01)。结论 敦煌芮草膏可能通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的激活,减少炎症因子的释放和表达,来发挥冻伤的治疗作用。
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单位甘肃中医药大学; 基础医学院