摘要
以食品工业中常用的木瓜蛋白酶为模式酶,建立了吸附-纤维素覆膜联合固定化酶方法.通过对吸附载体类别、纤维素种类及溶剂、保护剂种类及其浓度、干燥方式及时间等的优化,得到最佳的吸附-纤维素覆膜联合固定化酶工艺.以硅藻土或HPD-417(大孔树脂)作为吸附载体,甲基纤维素(分子量40000~50000)丙酮溶液作为覆膜溶液,加入6%(质量分数)的聚乙二醇或麦芽糖作为覆膜保护剂,于4℃干燥9 h,制得固定化木瓜蛋白酶,硅藻土吸附-纤维素覆膜固定化酶酶活回收率达到96.50%, HPD-417吸附-纤维素覆膜固定化酶酶活回收率达到93.92%.对吸附-纤维素覆膜固定化酶的性质进行了研究,发现纤维素覆膜后固定化酶具有良好的热稳定性,于80℃下保存12 h后,固定化酶活残余率仍然能保持90%左右;在pH=4.5~9.5的范围内,固定化酶的稳定性较好;连续使用9次后,固定化酶活残余率仍能保持95%左右.
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单位南方现代林业协同创新中心; 南京林业大学