一种新型的油樟叶片总RNA提取方法

作者：林娜; 高继海; 艾涛波; 范林洪; 王胜华; 陈放

来源：中国生物工程杂志, 2013, (05): 107-111.

DOI：10.13523/j.cb.20130517

• 油樟
• 总RNA
• 改良方法
• 乙酸乙酯
• 二氯甲烷
• 混合型高盐 Cinnamomum longepaniculatum Total RNA Modified method Ethyl acetate Dichloromethane High concentration of mixed salt

以油樟叶为试材,比较Trizol法、皂土法、CTAB法、Tris-SDS-异硫氰酸胍法等传统方案提取总RNA,发现效果都不理想。本文针对油樟叶片富含油脂、多酚、多糖的特点,开创性地使用了一种改良的总RNA提取流程:首次增加预处理液、乙酸乙酯抽提来减少油脂、多酚和多糖对裂解液粘稠度的影响,提取过程中使用二氯甲烷代替三氯甲烷增加对疏水性杂质的清除效果,使用混合型高盐溶液多次脱糖,结果表明使用改良的新型方法获得的油樟叶片总RNA条带清晰无明显降解,测得的A260/A280和OD260/OD230均在2.0左右,产物得率约580μg/g,通过RT-PCR扩增出了油樟18S rRNA基因序长为113bp...

• 单位
  四川大学; 宜宾学院