hi FGF2真核表达载体的构建及其高表达对细胞凋亡的影响

作者：陈钟琳; 姜红岩; 洪晓冰; 陈中华; 郑燕珊; 徐涵; 石刚刚; 黄展勤

来源：中国药理学通报, 2014, 30(11): 1535-1538.

• 高分子量碱性成纤维细胞生长因子
• 真核表达载体
• 转染
• 细胞凋亡
• HEK293细胞
• 流式细胞术

目的构建hi FGF2(high molecular weight isoform fibroblast growth factor-2,hi FGF2)真核表达载体,并观察其过表达后对细胞凋亡的影响。方法设计合成hi FGF2 cDNA模板引物,Nhel和Hind III双酶切pDsRed1-N1质粒,T4DNA连接酶重组hi FGF2质粒,PCR扩增目的基因,琼脂糖凝胶电泳检测及测序鉴定。将重组hi FGF2质粒瞬时转染HEK293细胞,荧光倒置显微镜检测转染效率。AnnexinV-FITC/PI双染法流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 hi FGF2真核表达载体符合设计要求,瞬时转染HEK293细胞的转染率达70%以上。过表达hi FGF2,HEK293细胞FITC/PI双染阳性率达(29.12±2.81)%,与正常组、转染空载体组差别有显著性(P<0.01或P<0.05)。结论成功构建hi FGF2真核表达载体,过表达hi FGF2导致细胞凋亡。

• 单位
  汕头大学医学院; 汕头大学医学院附属肿瘤医院