乙酰化微管蛋白在矽肺成纤维细胞中定位及表达变化

作者：张惠; 徐丁洁; 毛娜; 刘燕; 耿玉聪; 李世峰; 高学敏; 杨方; 徐洪

来源：中国职业医学, 2018, 45(02): 150-156.

• 煤工尘肺
• 矽肺
• 微管蛋白
• α-平滑肌肌动蛋白
• 大鼠
• 成纤维细胞

目的观察乙酰化微管蛋白α(Ac-tubulinα)在矽肺纤维化的成纤维细胞中的定位及表达变化。方法 (1)采用典型抽样方法,选取22例煤工尘肺尸检病例病变肺组织为煤工尘肺组,以其临近较为正常肺组织为对照组。(2)将无特定病原体级雄性大鼠随机分为对照组和5个染尘组,每组10只。采用动式吸入染尘方法,染尘组大鼠以质量浓度为2 000 mg/m3游离二氧化硅粉尘分别染尘2、4、8、12、16周,对照组大鼠不予染尘。(3)采用贴壁法原代培养大鼠肺成纤维细胞,予浓度为100 nmol/L的血管紧张素(Ang)Ⅱ分别诱导刺激0、5、15、30 min和1、3、6、12、24、48 h。(4)采用免疫组织化学法检测Ac-tubulinα和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,免疫荧光染色法观察Ac-tubulinα/Vimentin和Ac-tubulinα/α-SMA的表达,免疫印迹法检测Ac-tubulinα和α-SMA蛋白的相对表达水平。结果与对照组比较,煤工尘肺组病例肺组织中Ac-tubulinα表达阳性率下调(P<0.01),α-SMA表达阳性率上调(P<0.01)。免疫荧光染色结果显示,煤工尘肺组病例肺组织纤维化病变区域Vimentin阳性表达明显增强,Ac-tubulinα表达缺失;对照组正常肺组织中存在Ac-tubulinα和Vimentin共表达。动物实验结果显示,随染尘时间的增加,大鼠肺组织Ac-tubulinα表达量逐渐下调(P<0.01),α-SMA表达量逐渐上调(P<0.01)。采用AngⅡ诱导成纤维细胞向肌成纤维细胞分化,随诱导时间的增加,成纤维细胞中Ac-tubulinα表达量逐渐下调(P<0.05),α-SMA表达量逐渐上调(P<0.05)。结论 Ac-tubulinα的缺失表达可能参与了矽肺纤维化的发生与发展。

• 单位
  华北理工大学