甘蔗梢腐病串珠镰孢菌T-DNA插入突变体的构建及其鉴定分析

作者：王鑫; 崔一平; 王继华; 张木清

来源：基因组学与应用生物学, 2017, 36(02): 630-637.

DOI：10.13417/j.gab.036.000630

• 串珠镰孢菌
• 遗传转化
• 插入突变体库
• 表型变异
• 侧翼序列

甘蔗梢腐病是世界范围内重要的经济作物真菌性病害,其病原真菌为串珠镰孢菌(F.moniliforme)。通过农杆菌介导的遗传转化构建了串珠镰孢菌(菌株CNO-1)的突变体库,并通过Hi TAIL-PCR和菌落形态对突变体库进行鉴定。结果构建了库容量为956的CNO-1突变体库。从CNO-1突变体库中随机挑选6个转化子,进行PCR鉴定,结果均为阳性。CNO-1突变体库中,筛选出生长速度减慢突变体22个,色素变异突变体1个;对47株突变体进行Hi TAIL-PCR,扩增插入位点侧翼序列,得到有效序列22条,BLAST结果显示,T-DNA的22个插入位点分布在CNO-1的15条基因组scaffold上;生长速度减慢突变体的插入失活基因分别与细胞分裂、DNA修复、△12脂肪酸脱氢酶、E3泛素连接酶等有关。

• 单位
  亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室; 广西大学