重组人B细胞激活因子融合蛋白的表达、纯化及活性鉴定

作者：王茹; 林周; 魏化伟; 彭辉; 侯春梅; 冯健男; 沈倍奋; 黎燕

来源：军事医学, 2013, (02): 91-96.

• B细胞激活因子
• 受体
• 三聚体
• 相互作用
• 细胞增殖
• 表达纯化 B cell activating factor
• receptor
• trimer
• interaction
• cell proliferation
• expression and purification

目的获得人类B细胞激活因子(B cell activating factor,BAFF)胞外段融合蛋白并对其生物活性进行分析。方法构建pET32a/BAFF的原核表达载体,进行原核表达、亲和纯化,并通过SDS-PAGE、Western印迹进行鉴定。利用非还原电泳后的Western印迹与HPLC分析融合蛋白在溶液中的存在形式。ELISA、Octet RED系统检测rhBAFF结合受体TACI的能力并做出实时动力学分析。MTS法检测rhBAFF促进B细胞增殖的活性。结果融合蛋白在大肠杆菌BL21中以可溶形式高效表达,经Ni-NTA纯化获得的目的蛋白纯度超过90%;SDS-PAGE、Western印...

• 单位
  军事医学科学院基础医学研究所; 中国人民解放军第三0五医院