摘要
目的观察p EGFP-VEGF165质粒转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)可否促进脑缺血大鼠血管新生。方法全骨髓贴壁法分离获取第三代BMSCs,当BMSCs生长汇合率为80%90%时以脂转法转染p EGFP-VEGF165质粒。制作大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,分为模型组、BMSCs移植组(BMSCs组)、转血管内皮生长因子(VEGF)基因BMSCs移植组(BMSCs/VEGF组)。于造模后7、14、21 d进行神经行为学评分,免疫组织化学染色检测脑缺血边缘区血管内皮细胞标志物CD34和VEGF的表达,激光共聚焦显微镜观察血管生成情况。结果 BMSCs组与BMSCs/VEGF组大鼠神经功能(BRS)评分较模型组明显降低(P<0.01),BMSCs/VEGF组BRS评分低于BMSCs组,但差异无统计学意义(P>0.05)。与非缺血侧比较,BMSCs组和BMSCs/VEGF组缺血侧微血管直径、微血管面积均较其显著增加(P<0.05或P<0.01);BMSCs组和BMSCs/VEGF组微血管直径、微血管面积均较模型组显著增加(P<0.05),但BMSCs组与BMSCs/VEGF组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。7 d时BMSCs/VEGF组VEGF阳性细胞较BMSCs组VEGF表达显著增加(P<0.05),其他时间点两组比较差异无统计学意义(P>0.05);BMSCs/VEGF组CD34阳性表达在各时间点较BMSCs组有所增加,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论经VEGF基因修饰的BMSCs移植可提高缺血区血管生成,仅在移植后7 d比单纯BMSCs移植VEGF表达升高有显著性差异,在神经行为学评分、微血管新生、CD34表达等方面与单纯BMSCs比较,无明显优势。原因可能与VEGF165质粒转染效率不高及脑血管新生机制复杂有关。
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单位广州市番禺区中医院; 神经内科